细胞身份与命名规则 官方编号：CAF-HPV-Immortal-23P 规则：CAF 指癌相关成纤维，HPV 代表 E6/E7 永生化基因，23P 为 2023 年建系批次。STR 核心位点 D5S818=11,12；D13S317=9,11；D7S820=10,10，与...

SV40 大 T 抗原：拆掉细胞周期的两把锁 SV40 大 T 抗原进入细胞核后，先后与 Rb、P53 蛋白结合。Rb 被磷酸化失活，E2F 转录因子得以释放，G1-S 关卡失效；P53 被泛素化降解，细胞凋亡程序被静音。双重刹车...

先确认“CAF”身份：原代来源决定功能天花板 CAF 来源于肿瘤组织而非正常成纤维，选购时索要病理报告：肿瘤类型、分化级别、取材部位。乳腺癌 CAF 与胰腺癌 CAF 分泌谱差异可达 10 倍。供应商若无法提供病...

复苏：90 秒水浴与 24 小时静养 冻存管从液氮取出后，37 °C 水浴精确计时 90 秒，管中冰晶刚好消失即可。提前在 15 mL 离心管里预置 9 mL 完全培养基，细胞悬液沿管壁缓慢滴入，边滴边轻摇，稀释 DMSO 毒...

命名规范与身份唯一性 行业公认格式：物种-组织来源-永生化策略-编号。3359 代表 2023 年第 359 条入库记录，避免与早期批次混淆。官方全称为 HPSC-3359-hTERT/SV40，任何缩写缺失均被视为不合规。STR 位点...

环境稳定性巡检清单 培养箱每 24 h 记录一次温度与 CO₂ 浓度，允许误差 ±0.2 °C 与 ±0.1 %。每月拆洗水盘并更换无菌去离子水，防止真菌挥发孢子落入培养皿。遇到断电重启，先将箱内温度拉回 37 °C 再置...

细胞身份与编号体系 官方命名：HPSC-3223-hTERT/SV40 内部编号：3223 代表 2023 年 3 月建系的第 2 株，避免与早期批次混淆 STR 指纹：D5S818=11,12；D13S317=9,11；D7S820=10,12；...

双基因协同：突破衰老的两道闸门 原代子宫内膜基质细胞在体外经历复制衰老，主要由 p53/p21 和 Rb/p16 通路触发。SV40 大 T 抗原（SV40T）通过结合 p53 与 Rb 蛋白，解除细胞周期阻滞；hTERT 补充端粒酶活...

读懂命名：如何一眼识别“真永生化” 永生化细胞株的命名往往隐藏着技术路线。SV40T 指猿猴病毒 40 大 T 抗原，负责解除 p53/Rb 通路；hTERT 则是人端粒酶逆转录酶，负责维持端粒长度。两者联合表达通常意...

原代困境：山羊睾丸细胞的“三低”瓶颈 低增殖、低存活、低传代次数是原代山羊睾丸细胞的通病。体外 5–7 代后，β-半乳糖苷酶阳性率飙升至 85 %，类固醇合成关键基因 CYP11A1 表达下降 75 %。毒理试验窗口...

细胞来源与遗传背景 分离自 6 月龄萨能奶山羊睾丸曲细精管上皮，原代贴壁生长 4 代即出现衰老标志 β-gal 阳性率 80 %。SV40T 通过慢病毒载体 pLVX-EF1α-SV40T-Puro 单拷贝整合至 chr19:43,215,678 位点，...

病毒癌蛋白的“双钥匙孔”模型 HPV16-E6 与 E7 分别对应 p53 与 pRb 两个锁芯。E6 通过 E6-AP 泛素连接酶把 p53 拖进蛋白酶体，24 小时内降低蛋白水平 90 % 以上；E7 的 LXCXE 基序嵌入 pRb 口袋区，阻断其...