CCL16/HCC-4/NCC-4 选购指南：把趋化实验从“玄学”变“可重复”

名字三个写法，收货只认一个货号，别让 CD4 迁移距离差 30% 才回头找原因

命名统一：订单里写 CCL16，COA 必须出现 TNCC-4

NCC-4、HCC-4 都是早期文献叫法，UniProt 官方符号 CCL16。采购单、发票、质量证明三处名称不一致，现场核查会被判“物料不明”。下单前把 UniProt 编号 O15467 写进合同，厂家发货标签必须同步，防止后期发补。

蛋白长度选择：ΔN17 还是全长 120 aa？

信号肽剪切后成熟肽起点第 17 位丝氨酸，E.coli 表达常把 ΔN17 版本叫“成熟型”，活性比全长高 1.4 倍，适合趋化小室实验。全长 120 aa 带信号肽，昆虫系统表达，半衰期延长 2 h，动物注射更划算。细胞实验选 ΔN17，体内研究选全长，别让多余肽段抢受体位点。

纯度底线：SDS-PAGE ≥98% 不够，HPLC ≥99% 才有用

CCL16 带两对二硫键，错配一条杂带就能把 CCR1 拮抗变成部分激动。HPLC 面积归一法 ≥99%，且主峰保留时间批间差 ≤0.2 min，才算真正同质。收货先跑 RP-HPLC，梯度 5–65% 乙腈，0.1% TFA，主峰拖尾因子 >1.2 直接退货。

内毒素 ≤0.1 EU/mg：THP-1 细胞趋化 3 h 不跑偏

THP-1 对 LPS 阈值 0.05 EU/mL，工作浓度 50 ng/mL 时，内毒素 ≤0.1 EU/mg 才能把背景迁移压到 5% 以下。高于 0.5 EU/mg，细胞 3 h 自己往孔底钻，趋化指数虚高 0.8。索要 LAL 实测值，报告写“<0.1 EU/mg”却给不出数字，按 0.09 EU/mg 算体积，再评估极限用量。

载体蛋白陷阱：BSA 免费但 SPR 崩溃

部分厂商默认加 0.1% BSA 稳定剂，趋化实验觉得省事，做 SPR 的人得哭：BSA 竞争包被，信号漂移 30%。下单前勾选“no carrier”或“海藻糖-only”版本，价格通常不变，跳过透析除 BSA 的 4 h 前处理。

规格拆分：10 μg、100 μg、1 mg 怎么买不浪费

CCL16 工作浓度 20 ng/mL，24-well 趋化小室每孔 600 μL，一次实验消耗 12 ng。

• 10 μg 小管最多做 800 孔，单价高，适合预实验；
• 100 μg 单价降 40%，做整批抑制剂筛选能撑到文章补实验；
• 1 mg 再降 30%，分装 50 μL/管，液氮存 2 年活性无损失。

月用量>200 μg 直接选 1 mg，避免批次差异导致 IC50 漂移。

糖基化选择：CHO vs E.coli 价差 20%

CHO 版本在天冬酰胺 44 位带 N-糖，体内半衰期 1.8 h，小鼠尾静脉注射更持久。E.coli 无糖基，趋化活性高 15%，晶体学解析分辨率可到 1.9 ?。细胞实验选 E.coli，动物实验选 CHO，别让糖链差异导致迁移距离对不上。

校准品同步：NIBSC 92/794 国际参比

WHO 92/794 每支 1000 IU，赋值 1 IU = 0.047 μg CCL16。自建标准曲线前先用 92/794 做平行标定，偏差 ≤10% 才被监管认可。缺标定记录的实验室，现场核查会被判“定量准确性无法保证”。买蛋白时同步订一支参比，避免 IU-ng 换算出错。

运输温度：干冰 vs 蓝冰成本差 1 倍

蛋白在 4 ℃ 稳定 5 天，厂商用蓝冰运输就能省 200 元运费。实验排期紧、周末无人收货，选干冰防止滞留升温。提前查快递路由，中转站>2 次优先干冰，别让 37 ℃ 仓库把活性烤掉一半。