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MICA：让“找不到抗体”成为过去式的选购清单
发表时间：2025-10-10先认等位基因，再谈实验
MICA 全长 6.2 kb，5 个常见等位基因占据人群 90% 频率。MICA*008 缺失 6 个 GCT 重复，分子量比 *004 小 2 kDa，SDS-PAGE 位置直接偏移。采购前把细胞 STR 报告翻出来，等位基因写进采购系统备注，抗体公司会按对应序列做亲和测试，避免到货再换货浪费两周。
蛋白版本：胞外区起点决定糖型
- 75-308aa：昆虫细胞表达，Man?GlcNAc? 高甘露糖型，适合结晶，SPR 信号干净。
- 25-308aa：含部分柄区，HEK293 表达，复杂糖型，与 NKG2D 结合亲和力提高 1.4 倍，做流式更亮。
- 全长 1-383aa：带跨膜区，需加 0.1 % DDM 维持可溶，适合脂质体锚定实验，产量掉 60 %，价格直接翻倍。
抗体横评：克隆号背后是表位战争
| 克隆 | 表位 | 多态影响 |
|---|---|---|
| 6D4 | α1 62-70 | 识别 *004/*009，与 *008 结合掉 70 % 信号 |
| 3H5 | α2 148-156 | 不受 *008 缺失影响，可做泛检测 |
| AMO1 | 糖基化依赖 | 只能用于原生细胞，去糖基化 Western 直接白板 |
做肿瘤微环境双染，选 3H5-AF647 + CD8-AF488，补偿矩阵一次到位，不用反复调电压。
标签选择：His 位置影响 BLI 基线
C-His 与 N-His 在 SPR 芯片上取向不同，N-His 胺基密度高，芯片表面负电荷屏蔽明显，基线漂移 <1 RU/min。C-His 容易形成二聚体，动力学拟合需加二聚体模型，分析时间翻倍。下单前确认实验平台支持哪种取向，避免数据返工。
标准品形态：液体 vs 冻干，运输温度是隐藏成本
液体 MICA-Fc 融合蛋白 -80 °C 托运，干冰费 600 元/次，适合月用量 >500 管的高通量平台。冻干粉 4 °C 运输，重悬后 4 h 内活性掉 8 %，小实验室月用量 <100 管，选冻干平均单管省 4 元，一年省出抗体预算。
批次质控：把“糖谱一致性”写进合同
行业默认 SDS-PAGE 纯度 ≥95 %，但糖谱差异能让同一克隆抗体信号差 30 %。合同里加一条：到货 7 日内做 LC-MS 糖型谱，Man?-GLcNAc? 比例与参考批次差异 >5 % 直接退换，运费厂家承担。过去两年统计，能拦下 10 % 的隐性次品。
价格陷阱：按“测试数”计价最透明
市面三种计价方式换算成 1000 测试：
- μg 模式：200 μg，单价 1500 元/100 μg，总价 3000 元
- 测试数：1000 测试 2000 元，送 100 测试质控
- 整瓶模式：1 mg 2800 元，拆开 30 天用完，报废 15 %
月样本量 >800 选测试数，<300 选 μg 模式，中间值选整瓶会剩半瓶，浪费比高达 20 %。
现场验收：15 分钟三步法
- 扫码批号，比对官网糖谱，无新增杂峰
- 取 5 μL 蛋白 + 50 ng 3H5 抗体，流式 30 s，荧光强度落在参考值 ±10 %
- Gitter 云记录自动上传，厂家后台 24 h 内电子签章，质保期从签章日起算
