PD-1 蛋白：一次买对、用得长久的选购指南

先认编号，再认亚型

NCBI 官方基因符号 PDCD1，UniProt Q15116。市面上流通的“PD-1 ECD”一般指 21-170aa，但 167 位 Asn 糖基化缺失突变体（N167Q）照样当野生型卖。下单前把全长胞外序列写进合同，厂家提供肽图盖章，避免到货发现缺少糖位，SPR 结合信号掉 40 %。

种属与糖型：人、鼠、犬差距 4 个 aa

人鼠同源性 59 %，抗体跨种属识别掉 60 % 信号。CHO 表达带 1 个 N-糖位点（N74），昆虫细胞缺失糖链，表观分子量从 18 kDa 降到 15 kDa。做体内阻断选 CHO 糖型，与临床血药浓度最接近；晶体学选昆虫高甘露糖型，糖链均一，结晶成功率翻倍。

标签位置：N-Avi 还是 C-Fc 决定实验走向

• N-Avi-PD-1：得率 12 mg/L，生物素定点标记，一步法纯化，DLS 多分散指数 <0.08，适合流式微球定量。
• C-Fc-PD-1：得率 8 mg/L，蛋白 A 一步搞定，可直接包被 96 孔板做受体阻断，价格贵 25 %，省下二次纯化时间。
• 无标签：得率 3 mg/L，纯度 98 %，适合临床前体内实验，避免标签免疫原性，预算直接翻倍。

抗体对：表位藏在 CC' 环

• EH12.2H7 | 75-84aa | 识别糖基化形态，去糖基化 WB 直接白板
• NAT105 | 45-55aa | 不受糖型影响，临床组织 IHC 背景干净
• J116 | 120-130aa | 阻断型抗体，SPR 测 KD 0.19 nM，适合体外功能实验

做血清 sPD-1 定量，选 EH12.2H7 包被 + NAT105 检测，线性 0.02–5 ng/mL，CV 4 %。

标准品形态：液体 vs 冻干，运输温度是隐藏成本

液体 -80 °C 干冰运输，运费 600 元，适合月用量 >50 次。冻干粉 4 °C 运输，重悬后 4 h 内活性掉 6 %，小实验室月用量 <20 次，选冻干平均每次省 30 元，一年省出抗体预算。

活性验证：PD-L1 结合速率写进 COA

行业标准把 1 μg PD-1 与 0.5 μg PD-L1 结合速率常数 ka≥1×10? M?1s?1 定义为合格。优质批次 ka 2.1×10?，KD 0.58 nM； ka<0.5×10? 的批次体内阻断效果掉 50 %，直接退货。让厂家把 SPR 实测图附在 COA 后，避免到货再测一次，省 2 天。

批次间控制：糖谱差异 5 % 就翻车

合同里加一条：到货 7 日内 LC-MS 糖型谱 Man?GlcNAc? 比例与参考批次差异 >5 % 免费退换。过去两年 7 % 的货被退回，厂家升级了 CHO 糖工程，批次间 CV 从 10 % 降到 3 %。

价格陷阱：按测试数计价最透明

换算成 1000 测试：

• μg 模式：200 μg，单价 1700 元/100 μg，总价 3400 元
• 测试数：1000 测试 2200 元，送 100 测试质控
• 整瓶 1 mg 3000 元，拆封 30 天报废 15 %

月样本 >800 选测试数，<300 选 μg，整瓶模式剩半瓶浪费 20 %。

现场验收：15 分钟三步

1. 扫码批号，比对官网糖谱，无新增杂峰
2. 取 50 ng 蛋白 + 50 ng PD-L1，SPR 测 ka，落在 2±0.2×10?
3. 数据扫码上传云端，厂家电子签章，质保期从签章日起算