1. 重链恒定区序列差异：IgG2a与IgG2b只差7个氨基酸，Fc抗体却必须分选 IgG2a（IgHV-I）和IgG2b（IgHV-II）在CH2区存在7个非连续氨基酸替换，导致抗小鼠Fc二抗识别表位偏移。用抗IgG2a单克隆2C11做流式，交...

1. 标签只写 TWEAK 不够，要认 Fn14 活性才作数 供应商目录把“TNF-SF12”和“TWEAK”混着用，买到手可能缺失受体结合域。下单前核对氨基酸区间：Ala 106 – Leu 249 是人源 TWEAK 最小活性片段，Fn14 结合...

1. 活性单位换算：ED50 0.15 ng/ml 才是“真香”警戒线 WHO 标准把 FGF acidic 活性定义在 BALB/c 3T3 细胞 ED50 0.15 ng/ml，对应 6.7×10⁶ IU/mg。商品化标签写“100 μg”却不给 ED50，浓度调到 10 ng/m...

1. 网格策略： unstructured tetra 还是 immersed boundary？ 微流控芯片通道 50–200 μm，曲率半径 5×通道高，用传统四面体网格需 800 万单元才能捕捉壁面梯度。 immersed boundary 法把笛卡尔网格套在 ...

1. 选细胞系：先问细胞里有没有内源 RAGE CHO-K1 几乎零背景，适合转染；HEK293 高表达 HMGB1，自分泌配体造成基底信号 3×10⁴ RLUs，干扰梯度。用 qPCR 测内源 RAGE mRNA，ΔCt15 才合格。跳过这步，后续...

1. 把“总蛋白”和“磷酸化”放在同一张膜上，先算占比再谈变化 HSPB1 的伴侣功能取决于磷酸化开关，单测总 HSP27 看不出应激响应。跑 15% 分离胶，上样 20 μg，用 Phos-tag 胶可让磷酸化条带位移 8–12 k...

1. 为什么 AT-III 浓度≠活性：先拆穿品牌 COA 的文字游戏 血浆来源的 Antithrombin-III 在保存 6 个月后可能出现“抗原量 100%，活性 70%”的裂像。厂家只给浓度（mg/L）不给 IU/L，等于卖蛋白不卖功能。...

1. 先厘清：你买的是“培养基”还是“条件培养基” SCF 在细胞圈里被默认识别为 Stem Cell Factor，但商品化产品常把“含 SCF 的条件培养基”简写成 SCF Medium。下单前务必读小字，确认瓶里到底是： ...

分子量与聚合态：970 kDa 是理论还是实测 IgM 五聚体理论分子量 970 kDa，动态光散射（DLS）实测水合粒径 32–35 nm。批间差异 3 nm 说明 pentamer 解离成 hexamer 或单体，补体激活能力掉 50 %。技术单页...

国际单位空白：Activin A 为何至今没有 WHO IU Activin A 属于 TGF-β 超家族，糖基化模式差异大，CHO 表达的高糖型与 E.coli 无糖型在 SMAD2 磷酸化实验中 EC50 相差 3.2 倍。WHO 生物标准化专家委员会 20...

基质浓度：0.5 μg/cm² 是黏附坪值 VTN 通过 RGD motif 与整合素 αVβ3 结合，6 孔板每孔 9.6 cm²，理论需 4.8 μg。实测 0.5 μg/cm² 时 iPSC 贴壁率 95 %，降到 0.2 μg/cm² 瞬间掉到 70 %。用 PBS-Ca²...

抗体对溯源：克隆号 6H9 为何把 7 截短型漏掉 人源 CCL5 有 3 个天然截短型，缺失 2–7 位氨基酸。ELISA 捕获抗体若用克隆 6H9，表位落在 4–9 位，对 Δ2–7 截短型亲和力下降 90 %，结果把炎症样本低估 4...