读懂命名：如何一眼识别“真永生化” 永生化细胞株的命名往往隐藏着技术路线。SV40T 指猿猴病毒 40 大 T 抗原，负责解除 p53/Rb 通路；hTERT 则是人端粒酶逆转录酶，负责维持端粒长度。两者联合表达通常意...

原代困境：山羊睾丸细胞的“三低”瓶颈 低增殖、低存活、低传代次数是原代山羊睾丸细胞的通病。体外 5–7 代后，β-半乳糖苷酶阳性率飙升至 85 %，类固醇合成关键基因 CYP11A1 表达下降 75 %。毒理试验窗口...

细胞来源与遗传背景 分离自 6 月龄萨能奶山羊睾丸曲细精管上皮，原代贴壁生长 4 代即出现衰老标志 β-gal 阳性率 80 %。SV40T 通过慢病毒载体 pLVX-EF1α-SV40T-Puro 单拷贝整合至 chr19:43,215,678 位点，...

病毒癌蛋白的“双钥匙孔”模型 HPV16-E6 与 E7 分别对应 p53 与 pRb 两个锁芯。E6 通过 E6-AP 泛素连接酶把 p53 拖进蛋白酶体，24 小时内降低蛋白水平 90 % 以上；E7 的 LXCXE 基序嵌入 pRb 口袋区，阻断其...

培养箱微环境的三条铁律 温度漂移 ±0.5 °C 就会使倍增时间从 24 h 拉到 30 h。每月用校准级温度计抽检 6 个位点，偏差 0.2 °C 立即报修。CO₂ 浓度每偏离 1 %，pH 波动 0.1，镜下可见细胞边缘卷边。湿度...

细胞身份档案 来源于 38 岁女性乳腺叶状肿瘤，病理分级低度恶性。SV40 大 T 抗原通过慢病毒整合至 chr3:178,540,211，单拷贝，无旁侧基因破坏。STR 20 位点与原始肿瘤 100 % 匹配，无 HeLa、MDA-MB-231 交...

到货检查与开箱动作 收到干式液氮罐后，30 分钟内完成开箱。核对运输温度记录——全程需 ≤ -150 °C。冻存管外壁若出现裂纹或标签模糊，立即拍照并联系供应商。条码扫描入库，记录批次号、到货时间、运输...

背景痛点：原代脑膜瘤细胞体外“断崖式”衰老 WHO Ⅰ级脑膜瘤原代细胞在常规培养中 6–8 代即进入衰老期，β-半乳糖苷酶阳性率骤升至 80 % 以上，染色体端粒缩短至 4.2 kb。药物筛选、信号通路研究被迫中断...

细胞来源与背景 源自 42 岁女性 WHO Ⅰ级脑膜瘤手术标本，术后 4 h 内完成原代培养。病理确认 PR 阳性、Ki-67 指数 3%，无 NF2 突变。经两轮有限稀释法获得单克隆，命名为 iMen-001，STR 指纹与 ATCC 数据...

病毒大T抗原的结构钥匙 SV40大T抗原由708个氨基酸折叠成六个结构域，其中p53结合域（aa 350–450）与Rb口袋蛋白结合域（aa 100–250）是永生化核心。冷冻电镜显示，大T进入细胞核后形成六聚体环状结构，像...

1. 明确实验需求：从科学问题倒推细胞特性 下丘脑神经元研究通常围绕能量代谢、昼夜节律、神经内分泌三大方向。不同方向对细胞系的电生理活性、激素分泌谱、受体表达丰度有显著差异。以能量代谢研究为例，...

污染源监控：HPV-E6/E7 表达漂移预警 每月做一次 E6/E7 转录水平 qPCR，ΔCt 较基准批次变化 1.5 即视为表达漂移。漂移往往伴随支原体潜伏感染，需同步做 16S rRNA 快检，Ct ≥ 38 才算安全。 培养...