实验设计、审稿人质疑、审计核查，所有环节都绕不开一句“请提供技术参数”。下面把这支细胞株的核心指标拆到最小颗粒度，逐项给出可溯源的数值、测定方法和出处，让任何实验室都能直接引用或复现。 基因...

拿到一支冻存管，离真正跑稳实验还有一串细节。下面把从复苏、铺板、传代到功能验证的每一步拆成可复制的 SOP，直接给出关键参数和踩坑提示，照着做即可把细胞维持在最佳性能区间。 冻存管复苏：37 °C ...

实验室里每一次细胞复苏，都是一次成本与时间的博弈。选错细胞株，意味着三个月的实验周期、数万元试剂全部作废。下面这份指南，把采购决策拆成七个可落地的比对维度，直接给出可验证的实操方法，避免踩坑。 ...

日常巡检：显微镜下的四个关键指标 每天开机后先扫视整瓶： 细胞形态保持鹅卵石单层，边缘无拉丝 培养液颜色无突变成橘黄或紫红 悬浮死细胞 5 % 菌丝或颗粒闪光立即...

日常巡检：显微镜下的四个关键指标 每天开机后先扫视整瓶： 细胞形态保持鹅卵石单层，边缘无拉丝 培养液颜色无突变成橘黄或紫红 悬浮死细胞 5 % 菌丝或颗粒闪光立即...

SV40 Large T 抗原的“油门”机制 SV40 Large T 抗原通过双位点锚定 pRb 口袋结构域与 p53 核心区域，释放 E2F 转录因子并抑制 p21 表达。实验测得，pRb-E2F 复合体解离率 20 min 内升至 85 %，细胞在 12 h...

基因组修饰坐标 SV40T 片段整合于小鼠 11 号染色体 71.3 Mb 位点，单拷贝 PiggyBac 插入，两侧为 TTAA 靶点序列。全基因组测序显示插入后 SNV 负荷 1.8/Mb，Indel 负荷 0.3/Mb，均低于行业警示阈值 5/Mb。 ...

1 先厘清实验需求：动脉特异性还是通用内皮 SV40 永生化的小鼠颈动脉内皮细胞最突出的优势是保留剪切应力响应元件（KLF2、eNOS）。如果实验侧重动脉粥样硬化或血流动力学模型，应直接锁定“颈动脉来源”而...

细胞身份验证的强制阈值 STR 图谱必须覆盖小鼠 18 个核心位点，其中 14 个位点匹配率 ≥ 92 % 才签发批次合格证。任何等位基因漂移 8 % 即视为交叉污染，整批销毁并公开召回。原代来源组织需提供解剖影像...

复苏首日：时间轴与关键动作 收到干冰包裹立即拍照记录干冰余量，30 min 内置于 37 °C 水浴。震荡频率保持 80 rpm，管口始终在水面以上防止污染。90 s 内融化 90 % 冰晶后，逐滴加入 9 mL 预温完全培养基...

污染早期信号与应急处理 镜下发现细胞间隙闪光颗粒，48 h 内增殖停滞，多半为支原体。立即执行“三步净化”： 丢弃所有未处理培养瓶，防止气溶胶扩散。 用 BMEC-Detox 培养基（含 50 µg...

SV40 Large T 抗原的核定位密码 SV40 Large T 抗原携带两段核定位信号（NLS）：PKKKRKV 与 PAAKRV。进入胞浆后，importin-α/β 复合体识别 NLS，介导其穿越核孔。核内浓度在 2 h 内达到稳态，持续占据 p53...