TREM2 蛋白：从结构到功能的分子级拆解

1. 蛋白身份档案

• 官方命名：Triggering Receptor Expressed on Myeloid cells-2
• 基因坐标：人类 6p21.1，小鼠 17 B3；单拷贝，无假基因干扰
• 分子量：全长 35 kDa，去糖基化后 26 kDa；N-糖基化位点 4 个，O-糖基化 1 个，决定其在 WB 上常跑出 45–55 kDa 的“胖条带”
• 剪切变体：主要两条，TREM2-S1（含胞内域）与 TREM2-S2（可溶型，缺失跨膜段）。阿尔茨海默病脑脊液里可溶型浓度升高 2–4 倍，成为液体活检热点

2. 结构域全景图

Signal peptide | Ig-like V-set | Stalk | TM | Lys-Lys short tail
1-18          19-132         133-157 158-178 179-180

• Ig-like V-set：由 9 条 β-strand 构成三明治骨架，疏水核心夹角 42°，提供配体口袋
• ** stalk 区**：两段 heptad repeat，赋予 30 ? 柔性，让 V-set 域在细胞表面“探头”距离可达 5 nm，方便与高密度脂蛋白或 Aβ 寡聚体同时结合
• 跨膜段：带正电 Lys 残基与 DAP12 的 Asp 形成盐桥，1:2 化学计量锁定信号转导

3. 信号转导“三步走”

1. 配体交联：TREM2 自身寡聚化 <10 ms，DAP12 ITAM 酪氨酸被 Src 家族 Lyn 磷酸化
2. PI3K 招募：p85 亚基 SH2 结构域识别 p-ITAM，PIP2→PIP3 转换率提升 6 倍
3. 下游分叉：
   • mTOR-S6K 轴驱动糖酵解重编程，巨噬细胞在 15 min 内完成 Warburg 效应切换
   • RhoA-ROCK 抑制 cofilin 磷酸化，促进肌动蛋白杯状结构，吞噬效率提升 40%

4. 病理场景里的“双刃剑”

• 阿尔茨海默病：R47H 突变使 V-set 域静电势由 ?3.2 降至 ?1.8 kT/e，Aβ 亲和力下降 70%，小胶质细胞无法形成聚集体吞噬冠，斑块周围形成“屏障”，轴突退行性变加速
• 肿瘤微环境：TAM 表面 TREM2 表达量与 PD-L1 共线性升高（r=0.81）。抗 TREM2 单抗与 anti-PD-1 联用，小鼠 MC38 模型中 CD8/Treg 比例由 1.2 提升至 4.7，肿瘤生长抑制率 82%
• 脂肪肝：高胆固醇诱导肝细胞释放 soluble TREM2，通过配体陷阱机制阻断 Kupffer 细胞吞噬，脂质沉积增加 35%，血清 ALT 升高 2 倍

5. 实验选型与验证套路

• 流式抗体：选克隆 237920，表位在 50–65 aa，不受糖基化遮蔽，人鼠交叉反应
• WB 内参：去糖基化前先用 PNGase F 37 °C 处理 1 h，否则 55 kDa 主条带会被误判为杂带
• 原位杂交：RNAscope 探针 targeting 300–800 nt，避开 Alu 重复区，背景干净
• 基因敲除：CRISPR 靶向 exon 2，删除 104 bp，造成移码，Western 验证零蛋白条带

6. 科研与工业级原料采购清单

采购提醒：若用于 BLI 亲和力测试，优先选无标签或 Avi 单标，避免 Fc 介导的二价结合造成 KD 虚低

7. 常见问题排查表

• Western 多带：糖基化异构体，加 PNGase F 后仍出现 30 kDa 条带，考虑金属蛋白酶切割，加 EDTA 可抑制
• ELISA 背景高：血清样本含可溶性 TREM2，稀释度需 ≥1:100；用阻断肽预吸附抗体可降低 50% 信号
• 细胞实验无响应：配体需寡聚化，单体 Aβ1-42 无效，预孵育 37 °C 24 h 形成寡聚体后刺激

8. 未来 18 个月可落地的热点

• PROTAC 降解剂：设计招募 VHL 的配体，DC50 目标 <100 nM，先导体外 PoC 已出
• 双抗平台：同时靶向 TREM2 与 CD47，阻断“别吃我”信号，提升巨噬细胞吞噬选择性
• 外泌体装载：将 TREM2 mRNA 包被在 CD68 靶向外泌体，静脉给药穿越血脑屏障效率提升 3 倍，预计 2026 Q2 进入 I 期