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永生化人前列腺平滑肌细胞-SV40+hTERT 选购指南
发表时间:2025-08-27把市面上五花八门的宣传语拆成可核对的硬指标,花钱也花得踏实。
身份溯源:三份文件少一份就算半成品
- 供体病理报告:必须写明“良性前列腺增生”且附带 Gleason 评分 ≤ 6。
- 伦理批件:医院 IRB 编号、批准日期、知情同意书签字页,缺一不可。
- STR 鉴定证书:16 位点与原代模板 100 % 匹配,任何位点偏差直接淘汰。
双基因改造方式:PiggyBac vs 慢病毒差价 3 倍
PiggyBac 转座子单拷贝整合,无抗性基因残留,售价 1.2–1.5 万元/支;慢病毒多拷贝随机插入,残留 LTR,价格 0.4–0.6 万元/支。若计划后续做体内移植或 IND 申报,直接选 PiggyBac,省去二次清除抗性基因的 6 周时间。
表型保真度:看三张图不看广告词
- 免疫荧光:α-SMA、SM22α、CNN1 阳性率 ≥ 95 %,要求提供 20× 图。
- 收缩录像:10 μM 卡巴胆碱刺激 5 min,胶原凝胶直径缩小 ≥ 60 %,视频须 30 fps 无剪辑。
- 基因热图:与原代细胞皮尔逊系数 ≥ 0.90,MYH11、TAGLN 不得下调。
质检报告隐藏陷阱:数字背后的单位游戏
- 支原体 qPCR:检出限 ≤ 10 cfu/mL,标注引物序列与标准曲线 R2 ≥ 0.99。
- 无菌试验:14 天培养 + 7 天观察,报告写“无可见菌落”,而不是“符合药典”。
- 核型分析:46, XY 结构异常 ≤ 5 Mb,附带 G-banding 高清图像,拒绝低分辨率截图。
培养体系兼容性:避免实验室二次投资
- 基础培养基:DMEM/F12 + 2 % FBS 为通用配方,若商家要求特制无血清培养基,每 500 mL 额外加价 800 元需提前计入预算。
- 包被基质:0.1 % 明胶即可,若强制使用重组层粘连蛋白 511 E8,每月耗材成本增加 1500 元。
- 气体条件:常规 5 % CO? 即可,若需 5 % O? 低氧,培养箱升级费用 3 万元。
冻存规格与售后:把风险写进合同
- 冻存密度 5 × 10? cells/mL,1 mL/管,二维码可追溯。
- 干冰运输 48 h 温控记录,签收 4 h 内复苏存活率 < 90 % 免费补发。
- 售后条款:7 天内质量问题可退可换,额外赠送 1 次复苏技术支持视频连线。
价格对标:把隐藏成本算成总价
项目 | PiggyBac 版 | 慢病毒版 |
---|---|---|
细胞售价 | 1.3 万元 | 0.5 万元 |
无血清培养基 | 0.8 万元/年 | 0.8 万元/年 |
支原体清除潜在费用 | 0 | 0.3 万元 |
IND 申报前基因清除 | 0 | 1.5 万元 |
总 2 年持有成本 | 2.1 万元 | 3.1 万元 |
合同谈判清单:一次说清不留尾巴
- 交付物:细胞、质检报告、STR 原始峰图、培养基配方、SOP 文件。
- 保密条款:供体信息脱敏,商家不得二次销售同源细胞。
- 技术升级:若出现表型漂移,商家免费提供单克隆化服务一次。