酶活性单位定义与标准化

酶活性单位（U）是衡量G6PDH催化效率的核心参数。一个国际单位（U）代表在特定条件下（pH 8.0, 25°C），每分钟催化1微摩尔NADP?还原为NADPH所需的酶量。比活性（U/mg）进一步标准化了酶纯度，数值越高表明单位重量蛋白的催化能力越强。厂商通常提供基于国际生物化学与分子生物学联合会（IUBMB）标准的检定证书，确保跨批次实验数据的可比性。

纯度等级与杂质控制

电泳纯度 ≥90% 的G6PDH适用于多数生化分析，而 ≥99% 的级别则要求通过SDS-PAGE显示单一条带。关键杂质包括蛋白酶、其他脱氢酶及核苷酸酶，这些残留酶会导致检测背景升高或底物降解。高效液相色谱（HPLC）检测报告需明确杂质的最大允许限值，例如蛋白酶活性需低于0.001 U/mg。

稳定剂与保存条件参数

冻干粉形式的G6PDH通常含有蔗糖（5-10%）、磷酸盐缓冲盐（20-50 mM）及BSA（0.1-1%）作为保护剂。重组酶溶液需标注甘油浓度（通常50% v/v）和pH范围（7.0-8.0）。-20°C保存时活性衰减率应小于1%/年，4°C条件下运输允许的活性损失需在5%以内。开封后建议分装保存以避免反复冻融导致的二聚体解离。

动力学特性与底物特异性

Km值反映酶与底物的亲和力，优质G6PDH对葡萄糖-6-磷酸（G6P）的Km值范围为35-60 μM，对NADP?的Km值为2-8 μM。底物特异性通过交叉反应测试验证，要求对NAD?的催化效率低于NADP?的0.1%，且对6-磷酸果糖等类似物无显著响应。厂商需提供基于紫外分光光度法（340 nm）的动力学曲线原始数据。

应用场景匹配参数

诊断试剂盒用G6PDH要求内毒素含量＜10 EU/mg，避免体外检测中的免疫反应。工业发酵用酶则侧重热稳定性，需标注55°C下的半衰期（通常＞4小时）。显微镜级荧光检测需要极低的荧光背景，批检报告需包含激发/发射光谱扫描数据以确保无自发荧光干扰。