01 抗体对验证：p35 与 p40 亚基必须同时锁住 IL-12 p70 是 p35+p40 异源二聚体，市面上混进单抗 p40 的试剂盒会把 p80 同源二聚体也算进去。 要求厂家提供双抗体对表位映射： 捕获抗 p35 ...

01 灵敏度极限：官方 3 pg/mL 如何再砍一半 KET7010 给定的 LLOD 是 7.8 pg/mL，LLOQ 15 pg/mL。 实验室把样本体积从 100 µL 加到 150 µL，TMB 显色时间 20 min，背景 OD 450 控制在 0.025，信噪比 3...

01 开盒验收：铝箔袋含水率 ≥ 0.3 g 立即拍照退单 预包被板铝箔袋内置干燥剂 3 g，运输过程吸湿上限 0.5 g。 到货称重，袋总重比出厂标值高 0.3 g 即说明受潮，捕获抗体活性下降 10 %。 拍照+...

01 免疫识别：单克隆对 3 维表位像锁匙一样卡死 IL-5 是同源二聚体，两个链由二硫键 Cys44–Cys86 锁住。 捕获抗体克隆 TRFK5 识别位点在 α 螺旋 A 段 28–39 aa，亲和力 3.4 × 10⁻¹⁰ M。 检...

01 检测下限：官方 7 pg/mL 怎么压到 2 pg/mL Mouse IL-4 ELISA Kit 说明书给的是 7.8 pg/mL LLOQ，靠调整样本体积就能再下探。 把上样量从 100 µL 提升到 150 µL，信号抬升 1.5 倍，背景只涨 0....

01 把 IL-2 当成“细胞扩增油门”，先踩对点 IL-2 别名 TCGF、T cell growth factor，浓度 50 pg/mL 就能让 CD25⁺ T 细胞进入 S 期。 小鼠血清静息值 3–8 pg/mL，ConA 刺激 24 h 后冲到 800–1 200 ...

01 先搞清楚：你测的是哪种“IL-1β” IL-1β 的别名多到让人眼花：IL1B、IL-1、IL1-BETA、IL1F2、catabolin、pro-interleukin-1-beta…… 在选购小鼠白介素-1β ELISA试剂盒前，先确认样本类型与物...

1. 检测目标确认：前体 31 kDa 与成熟 17 kDa 同在一个盒 IL-1α 前体在细胞内占 80%，释放后由钙蛋白酶剪切成 17 kDa 成熟形。抗体若只抓成熟段（112-270 aa），前体阳性样本会被低估 40%。选“total IL-1...

1. 抗原形态决定信号：血清里 50% 是二聚体，剩余为单体 IFN-γ 活性形式为同源二聚体，单体 16.8 kDa，二聚体通过反平行 β-折叠稳定。捕获抗体若仅识别单体线性表位（如 20-35 aa），二聚体立体位阻导致...

1. 功能灵敏度 7 pg/mL 才是分界线 官方标 LOD 2 pg/mL 用缓冲液空白+3SD 算出，血清基质里 20% CV 对应 7 pg/mL。健康小鼠血清 GM-CSF 中位 12 pg/mL，炎症模型峰值 800 pg/mL，7 pg/mL 足够区分基线与炎...

1. 样本收集：麻醉方式影响血清 CCL2 基线 异氟烷麻醉刺激小鼠交感神经，血清 CCL2 从 60 pg/mL 升到 180 pg/mL；二氧化碳窒息 30 s 内采血，数值回落到 80 pg/mL。研究炎症基线必须统一用 CO₂ 窒息后心脏...

1. 检测下限定 0.1 ng/mL 是噱头，血清稀释 1:50 000 后功能灵敏度才 7 ng/mL 厂家用 PBS 空白+3SD 算出 LOD 0.1 ng/mL，真加到血清里，20% CV 对应 7 ng/mL。健康人 IgG 约 8–16 mg/mL，稀释 1:50 000 后...