一步到位拿到高纯度 His-tag 蛋白：KTP2001 盒内逻辑

KTP2001 把 Ni-NTA 树脂、缓冲液、离心柱、蛋白酶抑制剂片打包成一套，标称 2 h 完成裂解到洗脱。树脂粒径 90 μm，耐压 0.3 MPa，柱空体积 1 mL，可平行处理 12 个样本，单批纯化 0.5–20 mg 目标蛋白，兼容昆虫、哺乳动物、大肠杆菌三系表达系统。

盒内缓冲液配方：把杂质留在流穿里

• Lysis Buffer：50 mM NaH?PO?，300 mM NaCl，pH 8.0，0.1 % Tween-20，预先加入 1× 蛋白酶抑制剂，EDTA 浓度 0 mM，避免镍离子被螯合。
• Wash Buffer：20 mM 咪唑，pH 8.0，电导 29 mS/cm，让宿主蛋白先松动，His-tag 蛋白仍与 Ni2? 保持八面体配位。
• Elution Buffer：250 mM 咪唑，pH 8.0，一步洗脱，收集 3 × 0.5 mL 分段，纯度梯度实测 92 %→98 %→95 %，中间段直接用于后续结晶。

实测数据：KTP2001 vs 分装自配

E. coli 表达 42 kDa His-GST，上样 5 mL 澄清裂解液，总蛋白 12 mg：

把试剂盒写进论文，方法学一次过审

“Protein was purified using a His-tag protein purification kit (KTP2001, Ni-NTA resin 90 μm, 250 mM imidazole elution) following the manufacturer's 2-h protocol.” 一行写清货号、粒径、洗脱条件，编辑不再要求补充细节。

实验室省钱技巧：一盒三用

• 小规模筛选：1 mL 离心柱，50 mL 菌液就能跑 2 mg 蛋白，先做活性预实验再放大。
• 柱再生：50 mM EDTA 剥镍→0.5 M NaOH 30 min→重挂 NiSO?，循环 5 次载量下降 <3 %，平摊成本 40 %。
• 缓冲液兼容：Elution Buffer 含 250 mM 咪唑，直接上 SEC 不换液，省脱盐柱费用。