SV40永生化人类乳腺叶状肿瘤：技术参数全景图

细胞身份与来源

STR 20位点图谱与ATCC HTB-19胚乳瘤库同源度>97%，SV40大T抗原插入位点锁定于12q15区域，qPCR检测拷贝数2.1±0.2 copies/cell，批次间CV<5%。

倍增动力学

DMEM/F12+10% FBS条件下，群体倍增时间32±2 h；血清降至5%后延长至55 h，仍无显著凋亡峰，适合低血清药敏实验。

端粒长度与稳定性

P15代端粒长度保持11.8±0.3 kb，P30代仅衰减至10.7 kb，端粒酶活性比原代提升18倍，TRAP法检测ΔCt<3。

表面标志基准

流式八色组合：

• CD34-FITC 阳性率<2%
• CD90-PE 阳性率>95%
• SMA-APC 阳性率<5%
• Ki-67-BV421 增殖指数>35%

任意指标偏差>10%视为批次漂移。

三维球形成效率

超低吸附96孔板，每孔1×103细胞，72 h球体直径100–150 μm，形成率>80%，可用于药物渗透研究。

无菌与病毒安全

细菌16S rRNA、真菌ITS、支原体16S rRNA qPCR Ct≥38；HBV、HCV、HIV-1、HPV16/18实时荧光PCR Ct≥40。

冻存与复苏存活率

冻存液：90% FBS+10% DMSO，程序降温-1 ℃/min，液氮储存。复苏存活率≥85%，24 h贴壁率≥90%。

运输温控

干冰≥2 kg，72 h箱内-78±2 ℃，实时温度记录仪采样间隔≤2 min，超温>10 min触发退货。