永生化幼鸭肠上皮细胞-SV40：行业标准全景标准

细胞身份溯源标准

STR-禽源指纹图谱必须≥16个位点匹配度≥98%，同时线粒体COI基因序列与Anas platyrhynchos参考序列差异<0.3%。第三方复核由AAVCL（亚洲禽类细胞库）执行，每批次出具可追溯报告编号。

永生化基因插入位点图谱

SV40大T抗原整合位点限定于5号染色体短臂39.8-40.1 Mb区间，qPCR检测拷贝数2±0.2 copies/cell。插入位点偏离区段即视为非标准品，禁止进入市场。

无菌与病毒安全阈值

细菌、真菌、支原体三级检测：

• 细菌16S rRNA qPCR Ct≥35；
• 真菌ITS qPCR Ct≥35；
• 支原体16S rRNA qPCR Ct≥38。

鸭病毒性肠炎病毒(DEV)、禽流感病毒(AIV)实时荧光PCR必须阴性，Ct≥40。

染色体核型稳定性

连续培养至P20代，核型仍为2n=78，结构畸变率<3%。G带标准图由ISCN(2020)命名体系发布，畸变率超限即触发退市程序。

功能表型基准值

• TEER值：标准培养条件下≥800 Ω·cm2；
• 碱性磷酸酶活性：≥120 mU/mg protein；
• 黏液分泌量：Alcian blue法≥1.5 μg/10? cells/24 h。

任一项偏离±15%即判定批次失效。

培养基与添加剂唯一配方

DMEM/F12为基础，必须添加：

• ITS-X 1×；
• 鸭血清2%，须γ-辐照灭活；
• 重组鸭EGF 10 ng/mL；
• 丙酮酸钠 1 mM。

任何成分替换需重新提交标准验证。

冻存与复苏存活率红线

冻存液：92.5% K-SR + 7.5% DMSO。

程序降温：-1 ℃/min至-80 ℃，液氮储存。

复苏存活率≥85%，24 h贴壁率≥90%。低于指标整批召回。

标签与文档强制要求

包装外标签：细胞名称、P代次、STR编号、无菌二维码。

随箱文件：

• 细胞系来源授权书；
• 第三方质检报告原件；
• 培养基配方表；
• 运输温度曲线图。

缺失任一文件视为不合规批次。