永生化人类正常皮肤细胞 - hTERT 的选购指南
发表时间:2025-08-05一、选购前的基本认知
1.1 细胞系的来源与特性
永生化人类正常皮肤细胞 - hTERT 是通过将人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因导入原代皮肤细胞制备而成,使其获得在体外无限增殖的能力,同时保持正常细胞的遗传背景和功能特性。
1.2 细胞系的应用领域
这种细胞系广泛应用于皮肤生物学研究、药物开发、化妆品安全性评估等领域,可用于研究皮肤细胞的生长、分化、衰老机制,以及测试药物对皮肤细胞的影响。
二、细胞系供应商的选择
2.1 供应商的信誉与资质
选择具有良好信誉和相关资质认证的供应商,如细胞库或专业细胞供应商。这些供应商通常会对细胞系进行严格的鉴定和质量控制,确保细胞系的纯度、活性和特性符合要求。
2.2 细胞系的详细信息
供应商应提供细胞系的详细信息,包括细胞系的来源、生长特性、培养条件、传代次数等。这些信息对于研究人员正确使用和保存细胞系至关重要。
2.3 细胞系的质量保证
了解供应商提供的质量保证措施,如细胞系的纯度检测、活性检测、支原体检测等。选择经过严格质量控制的细胞系,以确保实验结果的可靠性。
三、细胞系的培养与保存
3.1 培养基的选择
根据细胞系的要求选择合适的培养基,通常是含有特定营养成分和生长因子的 DMEM 或 MEM 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)和 1% 青霉素 / 链霉素溶液。
3.2 培养条件的控制
细胞培养需要在 37℃、5% CO?、95% 空气的条件下进行,保持培养基的 pH 值稳定,确保细胞的正常生长。
3.3 细胞的冻存与复苏
冻存时,将细胞收集并制成单细胞悬液,加入含 5% DMSO 的冻存液中,轻轻混匀后分装于冻存管,放入 - 80℃冰箱中预冻,24 小时后转入液氮罐中长期保存。复苏时,从液氮中取出冻存管,迅速放入 37℃水浴中快速解冻,待细胞悬液完全解冻后,立即转移到含有适量预热培养基的离心管中,低速离心后去除上清,用新鲜培养基重悬细胞并接种到培养瓶中进行培养。
四、细胞系的实验验证
4.1 细胞生长曲线的绘制
接种细胞后,定期观察细胞的生长情况,绘制细胞生长曲线,以评估细胞的增殖能力和生长特性。
4.2 细胞功能的检测
通过检测细胞的特定功能,如胶原蛋白的分泌、细胞外基质的合成等,验证细胞系的功能特性。
4.3 细胞的遗传稳定性检测
定期对细胞系进行遗传稳定性检测,如染色体核型分析,确保细胞系在长期培养过程中保持遗传背景的稳定性。