1. 抗原形态决定信号：血清里 50% 是二聚体，剩余为单体 IFN-γ 活性形式为同源二聚体，单体 16.8 kDa，二聚体通过反平行 β-折叠稳定。捕获抗体若仅识别单体线性表位（如 20-35 aa），二聚体立体位阻导致...

1. 功能灵敏度 7 pg/mL 才是分界线 官方标 LOD 2 pg/mL 用缓冲液空白+3SD 算出，血清基质里 20% CV 对应 7 pg/mL。健康小鼠血清 GM-CSF 中位 12 pg/mL，炎症模型峰值 800 pg/mL，7 pg/mL 足够区分基线与炎...

1. 样本收集：麻醉方式影响血清 CCL2 基线 异氟烷麻醉刺激小鼠交感神经，血清 CCL2 从 60 pg/mL 升到 180 pg/mL；二氧化碳窒息 30 s 内采血，数值回落到 80 pg/mL。研究炎症基线必须统一用 CO₂ 窒息后心脏...

1. 检测下限定 0.1 ng/mL 是噱头，血清稀释 1:50 000 后功能灵敏度才 7 ng/mL 厂家用 PBS 空白+3SD 算出 LOD 0.1 ng/mL，真加到血清里，20% CV 对应 7 ng/mL。健康人 IgG 约 8–16 mg/mL，稀释 1:50 000 后...

1. 先锁定检测对象：VEGF-A 并不只有一条肽链 人 VEGF-A 经选择性剪接产生 VEGF₁₂₁、VEGF₁₄₅、VEGF₁₆₅、VEGF₁₈₉、VEGF₂₀₆ 等亚型，血清里 80% 是 VEGF₁₆₅，肿瘤积液里 VEGF₁₂₁ 比例升高。抗体若识别 121-16...

1. 抗原形态决定读数：血清里 90% 是三聚体，单体只占 3% TNF-α 在溶液里以三聚体稳定存在，单体半衰期 30 s。捕获抗体若识别单体线性表位（如 59-80 aa），三聚体立体屏蔽导致结合率下降 40%。选抗体对时...

1. 检测下限 ≠ 功能灵敏度，官方数据 1.2 pg/mL 实测只能到 9 pg/mL 说明书标注 LOD 用空白均值+3SD 算，血清基质里非特异性结合高 3 倍。功能灵敏度（20% CV 对应的最低值）才是真实门槛。把 8 块板 6 批...

1. 行业标准里找不到的“隐标准”：活性 vs 总蛋白 药典和 ISO 对 TGF-β1 ELISA 只规定灵敏度、回收率、批间 CV，却不区分“总 TGF-β1”与“活性 TGF-β1”。实验室拿到的血清样本 95% 以上是潜伏复合体...

1. 先确认测的是谁：RETN 还是 RETN1？ 抵抗素基因符号在 NCBI 被归并成 RETN，但早期文献里 RETN1、XCP1、HXCP1 仍在流通。采购前把基因 ID 锁定到 56729，核对试剂盒抗体针对的抗原表位位于成熟肽段 17-1...

1. 检出限 4 pg/ml：EP-17 报告才是硬通货 厂家标“4 pg/ml”常用“零孔均值+3SD”算法，LOQ 实际可能 12 pg/ml。 EP-17 方案要求 60 空白、3 批次、2 台仪器，LOB 1.5 pg/ml、LOD 4 pg/ml、LOQ 10 p...

1. 检出限 30 pg/ml：按 EP-17 还是“零孔+3SD” 真检出限需 60 次独立空白、3 批试剂、2 台仪器算 EP-17。厂家写“30 pg/ml”常按“零孔均值+3SD”充数，LOQ 实际 80 pg/ml。索要 EP-17 报告，报告里缺任...

1. 卤素灯寿命 800 h，第 700 h 就写换灯备忘录 瘦素浓度在 0.5–50 ng/ml 区间，标曲高端 OD 需冲到 2.8。卤素灯 700 h 后光强衰减 10 %，高端值掉到 2.5，低值样本被整体拉低 8 %。提前把灯编号贴到仪器...