灵敏度双阈值：分析灵敏度0.024 ng/mL只是门票，功能灵敏度0.05 ng/mL才决定能否区分低表达 分析灵敏度按2×SD零孔计算，可写进标书。功能灵敏度是让20% CV对应的实测浓度，试剂盒用高亲和兔单抗（Ka≥2.1...

开箱即检：三行记录决定能否签收 收货立刻拍箱体温度贴，高于 8 ℃ 拒收；随机抽 1 条板做 0 标准 OD，与出厂报告相差 10 % 以上直接退货；标准品复溶后上机，回算值偏离靶值 5 % 以内才入库。三步缺一行，...

灵敏度层级：分析灵敏度 0.05 ng/mL 只是门票 说明书首页常写 0.05 ng/mL，这是 2 SD 零孔对应浓度，只能用来写标书。真正决定能否区分正常低限的是功能灵敏度：连续三天、每天三批、CV 20% 对应的浓度。优...

竞争法核心：标记抗原与游离 T4 的“抢椅子” fT4 浓度低、蛋白结合率高，免疫分析只能走竞争路线。微孔板预包被抗 T4 单克隆抗体，加入样本与辣根过氧化物酶（HRP）标记的 T4 类似物。二者同时争夺有限结...

为什么 fT3 检测对试剂盒比仪器更敏感 游离三碘甲状腺原氨酸（fT3）在血清里的浓度只有 pg 级，标准曲线最陡的一段落在 1.0–8.0 pg/mL。曲线斜率每偏移 1%，结果就差 5–7%。这意味着板间差、抗体批间差、...

1. 样本前处理：脂血 + 结合蛋白双重封印 雌二醇 98 % 与 SHBG、白蛋白结合，竞争法只测游离部分。 释放策略： 稀释液含 0.1 % 吐温-20 + 0.5 % 8-苯胺-1-萘磺酸（ANS），pH 7.4，室温 10 ...

1. 先认分子：pregn-4-ene-3,20-dione 没有抗原臂 孕酮分子量 314 Da，属于半抗原，必须与大分子载体偶联才能免疫。 ** kit 差异点**： C3 羰基偶联 BSA 的抗体，对 17α-羟孕酮交叉 6 %，...

1. 目标分子画像：脂溶小 steroid 如何被抗体锁死 Testosterone 分子量 288 Da，环戊烷多氢菲骨架无抗原性。 免疫策略： 先在 C3 羰基或 C17β 羟基连接 OVA 载体，制成免疫原，小鼠免疫后...

1. 功能灵敏度：官方 0.01 μIU/mL 只是入场券 说明书给 0.01 μIU/mL 来自 20 个零孔平均+3SD，实测 10 批次试剂盒，功能灵敏度落在 0.015–0.02 μIU/mL。 发 IVF 降调报告时，0.02 μIU/mL 才能把...

1. 有效期不是贴纸：−70 ℃ 分装把 12 个月变成 18 个月 标准品冻干粉复溶后 4 ℃ 仅稳 48 h，−20 ℃ 反复冻融 3 次活性降 15 %。 做法： 复溶当天按 200 µL/管分装棕色冻存管，−70 ℃ 保...

1. 先分清目标：FSH 是 α+β，盒子只抓 β α 亚基与 LH/hCG/TSH 通用，真正给 FSH 发身份证的是 FSHB 基因编码的 111 aa β 链。 选购页面写“FSH alpha”字样的 kit 大概率测的是总量，交叉反应一...

1. 目标分子画像：LH 不是单体，是 αβ 异二聚体 LH 由 92 aa 的 α 亚基（与 hCG/FSH/TSH 共用）和 121 aa 的 β 亚基（LHB 基因编码）非共价结合而成。 试剂盒只测 β 链：抗体对锁定 β 亚基 39...