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ProteinA/G免疫磁珠:技术参数一页速览

发表时间:2025-11-04

1. 配基密度:磁珠表面能装多少蛋白

4 mg重组ProteinA/G共价偶联至1 mL 1 μm超顺磁珠,换算约14 nmol/mL;对人IgG静态结合量25 mg/mL,小鼠IgG2a 18 mg/mL,一瓶磁珠即可覆盖人-鼠抗体捕获,无需分开购买ProteinA磁珠与ProteinG磁珠。

2. 磁响应时间:从悬浮到澄清的秒表读数

磁饱和强度65 emu/g,1.5 mL离心管置于0.3 T磁力架,≥30 s溶液完全澄清;96孔板底部磁环0.15 T,90 s完成分离。响应慢于30 s说明磁珠氧化或聚集,需更换新批。

3. 粒径与比表面积:1 μm的黄金平衡点

平均粒径1.05 μm,CV<5%;比表面积45 m2/g,抗体结合动力学常数ka=8×10? M?1s?1,比2 μm磁珠快40%,比500 nm磁珠慢15%,兼顾结合速度与重悬性能,不易沉降。

4. 耐受边界:pH、盐、还原剂的许可范围

pH 2–13内4 h载量损失<3%;2 M NaCl、20 mM DTT、8 M尿素短期接触无影响;0.1% SDS使ProteinA/G脱落率>20%,清洗与保存阶段禁用。

5. 循环寿命:酸洗-碱洗衰减模型

标准流程:0.1 M柠檬酸pH 3.0洗脱→PBS漂洗→0.1 M NaOH 5 min去除内毒素→PBST保存。循环100次载量剩85%,200次剩68%;若改用pH 2.2甘氨酸,寿命缩短至80次,但洗脱体积缩小30%。

6. 温度与储存:4 ℃与室温的实测差异

4 ℃保存36个月,磁响应下降<5%;室温25 ℃放置6个月,磁响应下降10%,ProteinA/G脱落率2%;运输允许50 ℃持续48 h,载量损失<3%,夏季无需干冰,普通冰袋即可。

7. 质检硬指标:批次间红线

每批随货提供:

  • 人IgG动态载量(≥25 mg/mL)
  • 磁响应时间(≤30 s)
  • 游离ProteinA/G(ELISA≤0.1%)

任一项超±5%即判不合格,可无条件退换。

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