561 nm 激光器的新“红线”：A24421 技术参数全解

640 nm 通道被 APC 占满，488 nm 留给 FITC，561 nm 空档急需一条真红二抗。IFKine? Red 驴抗兔 IgG（A24421）标称 561 nm 激发、610 nm 发射，看似 PE 同类，拆包才发现量子产率、F/P 比、交叉吸附深度全是独立批次。下面把这份 COA 拆成 6 组硬核参数，直接告诉你仪器端怎么落地。

1. 光谱坐标：561 nm 激发效率 94%，610 nm 收集 90%

A24421 实测激发峰 561 nm，半峰宽 16 nm；发射峰 610 nm，半峰宽 24 nm。561 nm 激光器激发效率 94%，610/20 滤片捕获 90% 光子。同功率 20 mW 下，阳性 MFI 比 PE 低 8%，但渗漏到 575/26 仅 4%，比 PE 少 12 个百分点，做三激光四色时直接省 1 个补偿矩阵。

2. 荧光团内核：磺化菁-PEG 双臂，量子产率 0.42

IFKine? Red 采用磺化菁-PEG 长链偶联，分子量 1850 Da，荧光团离抗体 4.4 nm，自淬灭系数 0.06。量子产率 0.42，比传统 Cy3 高 20%。换算到流式：1 μg 抗体可产生 1.4×10^7 光子，足够让 1×10^4 细胞推到 1.1×10^4 MFI，处于 4-log 刻度中线。

3. F/P 摩尔比：2.6–3.0 区间出厂锁定

F/P 比 <2 亮度不足，>3.5 聚集沉淀。A24421 出厂前通过 A280 与 A610 双波长测定，F/P 严格 2.6–3.0。用户复测公式：

F/P = (A610 × 稀释倍数)/(180000 × 抗体摩尔浓度)

批次 CV<3%，直接保证定量可比，不再用“条带灰度”估浓度。

4. 交叉吸附：兔以外 8 物种 IgG 降到 ELISA 0.12%

驴血清天然含抗人、抗鼠、抗牛抗体。A24421 过 8 柱混合 IgG 吸附：人、小鼠、大鼠、仓鼠、羊、牛、猪、鸡。ELISA 检测交叉 <0.12%。小鼠脾脏组织里混入兔抗人 CD3 一抗，610/20 通道背景 200 MFI，阳性群 12000 MFI，信噪比 60 倍，不用额外封闭试剂。

5. 浓度与比活性：0.5 mg/mL，比活性 1.3×10^8 MFI/(μg·10^6 cell)

A24421 浓度固定 0.5 mg/mL，推荐工作稀释 1:100，终浓度 5 μg/mL。用 Rainbow 微球校准，比活性 1.3×10^8 MFI/(μg·10^6 cell)。换算成成本：1×10^6 细胞用 5 μL 原液，报价 720 元/100 μL，单样本 3.6 元，比 PE 二抗便宜 35%。

6. 热加速老化：45 ℃ 14 天活性保持 92%

运输箱温常飙 40 ℃。A24421 45 ℃ 14 天加速老化，WB 条带亮度下降 6%，流式 MFI 下降 8%，仍在合格线。收货后即使未及时冷藏，实验结果仍可追溯，减少批次退货纠纷。

7. 滤片匹配速查：4 台仪器现成数值照抄