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CXCL3/GRO-γ 选购指南:让每一次细胞实验花预算都花在刀刃上
发表时间:2025-10-111. 先厘清需求:重组蛋白还是抗体配对?
- 趋化实验:优先选无动物源、低内毒素重组蛋白,浓度梯度 1–100 ng/mL 即可观测中性粒细胞迁移。
- ELISA/Luminex:需要高亲和捕获抗体与检测抗体配对,注意与 CXCL1/2 交叉反应率 <0.5 %。
- IHC/IF:组织切片里 CXCL3 表达弱,选高敏兔单克隆,抗原表位靠近 C 端 α 螺旋,避免 N 端易降解区。
2. 表达系统决定钱包厚度
- E.coli:产量高、成本低,售价 100 μg 约 800–1200 元;无糖基化,活性与天然差异肉眼难辨,适合体外趋化。
- HEK293:真核糖基化,血清半衰期长 1.8 倍,售价翻倍;做小鼠体内炎症模型更稳,预算充足再考虑。
- 无动物源 CHO:临床前安全性报告可直接引用,每 100 μg 报价 3000+,适合申报 IND 阶段。
3. 标签取舍:His 还是 Tag-free?
- His 标签:纯化得率高,镍柱一步搞定;做晶体或 NMR 需切标签,额外花费凝血酶 200 U 成本。
- Tag-free:Native 序列,体内实验更可信;纯化步骤多 2 步,厂家会把成本转嫁给用户,溢价 30 %。
4. 活性单位如何对标?
- 看 EC50 而不是广告页写的“bioactivity”。
- 用经典 Transwell 法:中性粒细胞 5×10? / 孔,上腔 300 μL,下腔 600 μL,37 ℃ 1 h,EC50 应在 5–15 ng/mL。
- 若厂家只写“active”而无数值,要求 COA(Certificate of Analysis),不提供直接淘汰。
5. 包装规格与分装策略
- 常规 10 μg、50 μg、100 μg 三档。
- 做剂量响应曲线选 10 μg×5 支独立包装,避免反复冻融;做动物模型直接买 500 μg 大包装,单价降 25 %。
- 自带分装管优于整管,每管 20 μL 预分,减少实验室手套污染概率。
6. 冻干 vs 液体:运输温度陷阱
- 冻干:常温运输,收到后 4 ℃保存 24 个月;复溶后一次性用完最佳,剩余液体液氮速冻可再撑 2 周。
- 液体:–80 ℃干冰运输,运费 200 元起;到货直接放–80 ℃,活性无损失,适合没冻干设备的实验室。
7. 证书与批次追溯
- 要求提供 SDS-PAGE、SEC-HPLC、内毒素、生物活性四张图,缺一张就换供应商。
- 批次号与库存管身激光雕刻一致,拍照留档;发文章时审稿人会查。
8. 售后与技术支持
- 问清是否 24 h 内响应技术邮件;CXCL3 做 ELISA 出现高背景,厂家能远程协助优化封闭液配方。
- 承诺活性问题 7 天包换,来回运费卖方承担,写进采购合同。
9. 价格横向对比实例
品牌 | 表达系统 | 规格 | 报价 | 活性 EC50 | 推荐指数 |
---|---|---|---|---|---|
A | E.coli | 50 μg | 1100 元 | 8 ng/mL | ★★★★☆ |
B | HEK293 | 50 μg | 2300 元 | 6 ng/mL | ★★★★★ |
C | CHO | 50 μg | 3200 元 | 7 ng/mL | ★★★☆☆ |
10. 下单前的最后核对清单
- [ ] 确认序列与 UniProt P19876 完全一致,无额外 N 端 Met
- [ ] 内毒素 ≤0.1 EU/μg
- [ ] 提供生物活性 EC50 具体数值与检测方法
- [ ] 包装支持分装,标签可选
- [ ] 售后条款写进合同