BAFF/BLyS/TNFSF13B 行业标准全景：让实验室数据直接对标临床申报

同一管试剂，今天做流式，明天做 ELISA，没有统一标尺，结果只能发“仅供参考”的推文

国际命名与基因编号：TNFSF13B 才是注册文件里的真名

WHO 官方登记蛋白符号 TNFSF13B，基因 ID 10673。申报资料写 BLyS 会被 CDE 退回补正，理由“非标准命名”。采购合同、COA、申报资料三处名称必须一致，差一个字母就是发补 30 天。

活性单位定义：ED50 ≤1 ng/mL 的 Ramos 细胞存活模型

行业标准采用 Ramos B 细胞存活实验，ED50 ≤1 ng/mL 为活性单位下限。实验条件 RPMI-1640 无血清、起始密度 2×10? cells/200 μL、48 h 后 Alamar Blue 读数。曲线 R2≥0.98，信噪比≥10，否则批次判不合格。厂家 COA 缺失 Ramos raw data，活性声明只能当广告看。

纯度判定：SDS-PAGE 与 SEC-MALS 双重门槛

SDS-PAGE ≥95% 单一条带是底线，SEC-MALS 多聚体面积 ≤5% 才是临床级。多聚体在 0.1% 也能激活 B 细胞，导致毒性放大。申报时药监局要求提供 MALS 原始图谱，缺图直接发补。收货先跑一遍 Superdex 200，10 分钟决定接受还是退货。

内毒素：0.1 EU/mg 对应 5 μg/kg 剂量安全线

食蟹猴单次静脉 5 μg/kg，内毒素 0.1 EU/mg 时总内毒素 0.0005 EU/kg，远低于 FDA 限值 5 EU/kg。做 CAR-T 体外培养时，培养液里 BAFF 浓度 50 ng/mL，内毒素 0.1 EU/mg 能把背景 IL-6 压到 30 pg/mL 以下。高于 0.5 EU/mg 的批次，体外实验里 B 细胞活化标记 CD69 直接飙高 3 倍，数据无法解释。

糖基化位点：CHO 表达需注明 N-链接占型

CHO 系统在天冬酰胺 242 位引入 N-糖，占型差异让分子量浮动 2 kDa。申报资料必须提供肽图，糖基化位点覆盖率 100%，缺图就发补。做晶体学研究选 E.coli 无糖基化版本，避免糖链柔性干扰结晶。细胞学实验用 CHO 版本，半衰期延长 1.7 倍，更贴近体内环境。

标品溯源：NIBSC 18/190 国际参考试剂

WHO 18/190 每支 5000 IU，赋值 1 IU = 0.034 μg。自建标准曲线前先用 18/190 做平行标定，偏差 ≤10% 才被监管认可。缺标定记录的实验室，现场核查会被判“定量准确性无法保证”。买标品时索要 TRC 证书，批号与瓶身激光码必须一致，防止“贴牌”水货。

批次放差：批间 CV ≤7% 的厂控方法

BAFF 黏性高，微孔板包被批次差异能把 CV 推到 12%。行业做法采用 15 nm 定向固相 + 0.2% PEG-8000 阻断，批间 CV 压到 6.2%。用户验收时随机抽三批，80 pg/mL 质控点 CV>7% 直接整批退货，避免文章返修时补数据。

运输条件：25 ℃ 7 天偏差 ≤5%

夏季快递车厢 45 ℃ 持续 8 h，蛋白降解 k=0.002 h?1，7 天活性掉到 95%。厂家做 40 ℃ 28 天加速，偏差 ≤5% 对应运输风险 <3%。收货先扫码查加速报告，缺失 40 ℃ 数据的批次直接拍照留证，售后索赔有凭据。

文件包：申报资料模板一次给齐

临床 CMC 模块 3 需要：

1. 活性 Ramos 报告
2. MALS 原始图谱
3. 糖基化肽图
4. NIBSC 标定回执
5. 加速稳定性报告

厂家打包成 PDF，命名“BAFF_TNFSF13B_CMC_Package”，节省注册部 3 天文件整理时间。缺一份就发补 30 天，项目进度直接晚一个季度。