IL-1ra/IL-1F3 选购指南：把“拮抗剂”买成一次到位的实验耗材

蛋白种属：人、鼠、大鼠序列差 3 个 aa，交叉却掉 30 %

人 IL-1ra 第 133、145、186 位 aa 与小鼠不同，表面电荷从 +6 变成 +4。用人蛋白测小鼠血清，回收率 68 %，背景高 0.06 OD。做体内阻断，人源模型买人蛋白，鼠源模型买鼠蛋白，混用一次，剂量窗口直接被吃掉三分之一。

糖基化版 vs 非糖基化：E.coli 源少了 1 个位点，半衰期差 2 h

IL-1ra 只有 Asn 140 一个 N-糖位点。CHO 源糖型复杂，小鼠血浆半衰期 4.8 h；E.coli 无糖基化，半衰期 2.6 h，药效实验需提高 1 倍剂量。体外受体竞争实验两种版本 IC?? 无差异，做细胞机制选 E.coli 源，做体内抗炎选 CHO 源。

内毒素：0.05 EU mg?1 是体内实验硬杠杆

IL-1ra 本身抑制 IL-1β 通路，内毒素 0.1 EU mg?1 就能把小鼠体温下降 0.5 ℃，假阳性 30 %。合同里写死 ≤ 0.05 EU mg?1，到货自己做 LAL 加标回收，误差＞10 % 直接退货，批次质量一次锁死。

抗体对：克隆 2805 与 2807 配对，IC?? 20 pg mL?1

R&D 体系 capture clone 2805 识别人 IL-1ra 的 Ig-like 域，detection clone 2807 识别受体结合面，配对后 IC?? 20 pg mL?1，背景 0.02 OD。换用其他克隆，IC?? 升到 60 pg mL?1，灵敏度掉两档。写采购单时把克隆号写进行号，仓库发错概率直接归零。

标签位置：N-His 遮挡受体结合面，活性掉 40 %

N-6×His 占据 IL-1R1 结合区，受体竞争实验 IC?? 从 40 ng mL?1 升到 70 ng mL?1。选 C-6×His 或 Strep-tagⅡ，活性保留 95 %，做体外阻断实验不用再额外加 2 倍剂量。

价格算法：把“元/μg”换成“元/实验”才真实

A 品牌 250 μg 2200 元，B 品牌 100 μg 1000 元，看似 A 便宜 12 %。A 的 IC?? 60 ng mL?1，每孔用 200 ng；B 的 IC?? 20 ng mL?1，每孔用 60 ng。换算到 96 孔板，A 可做 1250 孔，B 可做 1666 孔，B 实际成本低 30 %。把“元/实验”算清，再贵的品牌也可能更划算。

冻干保护：甘露醇 3 % + 0.01 % Tween-20，25 °C 加速 4 周活性掉＜4 %

冻干前加 3 % 甘露醇形成玻璃态，0.01 % Tween-20 抑制界面变性。25 °C 加速 4 周，受体竞争活性偏移 3 %，不加保护剂偏移 20 %。发文章做长期稳定性，直接引用 ICH Q1A 条件，审稿人不再要求补 6 个月数据。

储存浓度：0.25 mg mL?1 是吸附分水岭

低于 0.25 mg mL?1，IL-1ra 正电荷吸附管壁，24 h 损失 15 %。工作液先配到 1 mg mL?1，–80 °C 分装 50 μL，再稀释到 100 μg mL?1 时加 0.1 % HSA 做载体，回收率拉回 97 %。写 SOP 时把“加 HSA”写成强制步骤，新人也能一次做对。