CheKine™ ATP柠檬酸裂解酶（ACL）活性检测试剂盒：精准检测ACL活性，洞察脂类代谢核心

胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）是细胞代谢中的关键酶，催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸，同时生成 NADPH。CheKine? 胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）活性检测试剂盒（微量法）以其精准、高效的检测性能，为科研人员提供了一种理想的工具，助力深入探究 ICDHc 在细胞代谢、氧化还原调控及疾病机制中的关键作用。

ICDHc 的生理功能与作用机制

NADPH 生成的关键途径

ICDHc 在细胞质中催化异柠檬酸脱氢脱羧反应，生成 α-酮戊二酸和 NADPH。NADPH 是细胞内重要的还原型辅酶，为脂肪酸、胆固醇等生物合成提供还原力，同时维持细胞的氧化还原平衡，抵御氧化损伤。

代谢调控的核心节点

ICDHc 的活性受到多种因素的精细调控，包括底物浓度、 allosteric 效应和共价修饰等。在细胞应对氧化应激、快速增殖等生理状态时，ICDHc 活性上调，增加 NADPH 的生成，满足细胞的合成代谢和抗氧化需求。

ICDHc 与疾病的关系

氧化应激与抗氧化防御

ICDHc 提供的 NADPH 是细胞抗氧化防御系统的重要组成部分。在氧化应激条件下，ICDHc 活性增强，促进 NADPH 生成，为谷胱甘肽还原酶等抗氧化酶提供还原力，清除活性氧（ROS），减轻氧化损伤。ICDHc 功能缺陷可能导致细胞抗氧化能力下降，增加氧化损伤相关疾病的风险。

代谢性疾病

在糖尿病、肥胖症等代谢性疾病中，ICDHc 活性异常影响脂质代谢和胰岛素信号通路。研究表明，ICDHc 活性降低可能导致 NADPH 生成不足，影响脂肪酸合成和代谢调控，加剧胰岛素抵抗和脂毒性。

CheKine? ICDHc 活性检测试剂盒（微量法）工作原理

CheKine? 胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）活性检测试剂盒采用比色法原理，利用 ICDHc 催化异柠檬酸和 NADP?生成 NADPH。NADPH 在 340 nm 处具有特征性吸光度，通过分光光度计测量吸光度值的变化，即可定量评估 ICDHc 的活性。该试剂盒操作简便、灵敏度高、特异性强，适用于多种生物样本，包括动植物组织、细胞培养物和血清等。

试剂盒应用与研究案例

氧化应激研究

在氧化应激研究中，ICDHc 活性检测可用于评估细胞的抗氧化能力。例如，在研究氧化剂对细胞损伤模型的影响时，检测细胞中 ICDHc 活性发现，活性显著降低，表明氧化剂抑制了 ICDHc 的活性，导致 NADPH 生成减少，细胞抗氧化能力下降。通过抗氧化剂干预后，ICDHc 活性恢复，验证了抗氧化剂的保护作用。

代谢性疾病研究

在代谢性疾病研究中，ICDHc 活性检测可用于探究疾病机制和筛选药物。例如，在高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型中，检测肝脏组织中 ICDHc 活性发现，活性显著降低，伴随着脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗。通过使用代谢调节剂，ICDHc 活性恢复，脂质代谢和胰岛素敏感性得到改善，为代谢性疾病治疗提供了潜在策略。

操作使用要点

样本准备与处理

对于动植物组织样本，需准确称量后，利用适当的缓冲液进行匀浆处理，确保细胞充分破裂释放 ICDHc。细胞培养物和细菌样本则需通过离心收集细胞，用预冷的缓冲液洗涤并制成匀浆。血清样本需避免溶血和反复冻融，以确保检测结果的准确性。

检测步骤

严格按照试剂盒说明书的操作步骤执行。首先将样本和标准品加入反应体系，随后依次加入检测试剂，包括异柠檬酸、NADP?和其他辅助试剂，充分混匀后在特定温度下孵育。孵育完成后，使用分光光度计在 340 nm 波长下测量吸光度值，并依据标准曲线计算 ICDHc 的活性。

质量控制与结果分析

每次检测应设置空白对照、阴性对照和阳性对照，以确保检测结果的准确性。对已知浓度的标准品进行重复检测，计算其变异系数（CV），一般要求 CV 控制在一定范围内，如小于 10%，以确保数据的稳定性和重复性。

试剂盒选择要点

检测原理与方法对比

目前市面上有多种 ICDHc 活性检测试剂盒，采用不同的检测原理，如比色法、荧光法等。CheKine? 试剂盒采用的比色法具有操作简便、成本较低、检测快速等优点，适合大多数实验室常规使用。荧光法具有更高的灵敏度和特异性，但需要配备荧光光度计。因此，在选择试剂盒时，应根据实验室设备条件、实验需求以及对检测灵敏度和速度的要求，综合考虑检测原理的适用性。

样本类型与适用范围

CheKine? 试剂盒适用于多种生物样本，包括动植物组织、细胞培养物和血清等。在购买前，务必仔细阅读试剂盒说明书，确保其与所检测的样本类型相匹配，以保证检测结果的准确性和可靠性。

灵敏度与检测范围评估

试剂盒的灵敏度和检测范围是影响检测结果准确性的关键因素。CheKine? 试剂盒具有较宽的检测范围和较高的灵敏度，能够检测到样本中较低浓度的 ICDHc 活性变化。在选择试剂盒时，应了解其检测灵敏度和范围，并结合实验中预期的样本 ICDHc 活性水平进行选择。若试剂盒灵敏度不足，可能导致低浓度 ICDHc 样本的检测结果不准确或假阴性，从而影响对代谢状态或疾病机制的评估。

试剂盒品质与稳定性考量

选择质量可靠、稳定性好的 ICDHc 活性检测试剂盒对于保证检测结果的准确性和重复性至关重要。在购买前，可通过查看试剂盒的用户评价、相关文献引用情况以及生产厂家的信誉和资质等信息，对试剂盒的质量和性能进行全面评估。CheKine? 作为知名品牌的试剂盒，经过严格的质量控制和性能验证，具有良好的稳定性和批次间一致性，能够为科研人员提供稳定可靠的检测结果。同时，注意试剂盒的保存条件和有效期，严格按照说明书要求进行保存和使用，以确保试剂的活性和性能不受影响。