CheKine™ 磷酸果糖激酶（PFK）活性检测试剂盒：精准检测 PFK 活性，洞察糖酵解调控

磷酸果糖激酶（PFK）是糖酵解途径中的关键调节酶，其活性的精准检测对于研究细胞代谢和能量调节具有重要意义。CheKine? 磷酸果糖激酶（PFK）活性检测试剂盒（微量法）为科研人员提供了一种高效、可靠的检测手段，适用于多种生物样本。

PFK 的生理功能与作用机制

糖酵解的限速酶

PFK 催果树糖 - 6 - 磷酸（F6P）和 ATP 转化为果糖 - 1,6 - 二磷酸（F1,6BP）和 ADP，是糖酵解途径中的关键限速步骤。通过调节糖酵解的速率，PFK 在细胞能量代谢中发挥核心作用。

代谢调控枢纽

PFK 的活性受到多种因素的精细调控。例如，ATP 和柠檬酸是 PFK 的抑制剂，当细胞内能量充足时，ATP 和柠檬酸水平升高，抑制 PFK 活性，减缓糖酵解；而 AMP 则是 PFK 的激活剂，当细胞能量不足时，AMP 浓度上升，激活 PFK，加速糖酵解以提供更多能量。

PFK 与疾病和生理状态的关系

肿瘤代谢

肿瘤细胞的糖酵解速率显著高于正常细胞，这一现象称为 “瓦博格效应”。在肿瘤细胞中，PFK 的活性通常较高，以满足快速增殖的能量和物质需求。检测 PFK 活性有助于研究肿瘤代谢特征，并为开发新型抗癌药物提供潜在靶点。

糖尿病和代谢综合征

PFK 在胰岛 β 细胞中的活性与胰岛素分泌密切相关。研究表明，PFK 活性的改变可能影响胰岛素的合成和分泌，进而参与糖尿病的发病机制。此外，PFK 在肝脏中的活性也与糖异生和糖原合成有关，其功能异常可能加剧代谢综合征的发展。

CheKine? PFK 活性检测试剂盒（微量法）工作原理

CheKine? PFK 活性检测试剂盒采用比色法原理，利用 PFK 催化 F6P 和 ATP 生成 F1,6BP 和 ADP。F1,6BP 进一步与检测试剂反应生成有色产物，在特定波长下具有特征吸收峰。通过分光光度计测量吸光度值的变化，即可定量评估 PFK 活性。该试剂盒具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点，适用于动植物组织、血清（浆）、细胞、细菌等多种样本。

操作使用要点

样本准备与处理

对于组织样本，需准确称量后，利用适当的缓冲液进行匀浆处理，确保细胞充分破裂释放 PFK。细胞和细菌样本则需通过离心收集细胞 pellet，用预冷的缓冲液洗涤并制成匀浆。血清样本需避免溶血，及时分离血清以防止细胞破裂释放 PFK 影响检测结果。

检测步骤

严格按照试剂盒说明书操作，将样本和标准品加入反应体系，依次加入检测试剂，充分混匀后在特定温度下孵育。孵育完成后，使用分光光度计在指定波长下测量吸光度值，并根据标准曲线计算 PFK 活性。

质量控制与结果分析

每次检测设置空白对照、阴性对照和阳性对照，确保结果准确性。对已知浓度标准品重复检测，计算变异系数（CV），一般要求 CV 小于 10%，保证数据稳定性和重复性。

试剂盒选择要点

检测原理与方法对比

市面上 PFK 活性检测试剂盒有多种检测原理，如比色法和荧光法。CheKine? 试剂盒采用比色法，操作简便、成本低、检测快速，适合常规实验使用；荧光法灵敏度和特异性高，但需荧光光度计。选择时应综合考虑实验室条件和实验需求。

样本类型与适用范围

CheKine? 试剂盒适用于多种样本类型，包括动植物组织、血清（浆）、细胞、细菌等。选购房时需仔细阅读说明书，确认试剂盒与样本类型匹配，以确保检测结果准确可靠。

灵敏度与检测范围评估

试剂盒灵敏度和检测范围是影响结果准确性的关键。CheKine? 试剂盒有较宽检测范围和较高灵敏度，能检测样本中较低浓度的 PFK 活性变化。选购房时，需了解其灵敏度和范围，结合样本中预期 PFK 活性水平选择。若灵敏度不足，可能导致低浓度样本检测结果不准确或假阴性，影响实验评估。

试剂盒品质与稳定性考量

选择质量可靠、稳定性好的 PFK 活性检测试剂盒对保证结果准确性和重复性至关重要。购买前可查看用户评价、文献引用及厂家信誉，评估质量性能。CheKine? 作为知名品牌，经严格质量控制和性能验证，具良好稳定性和批次一致性，可提供稳定结果。同时，注意保存条件和有效期，按说明书要求操作，确保试剂活性和性能。