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CheKine™ 过氧化氢酶（CAT）活性分析试剂盒（微量法）：解析抗氧化防御体系关键酶活性
发表时间：2025-05-16一、试剂盒概述
过氧化氢（H?O?）是活性氧代谢的副产物，也是细胞内信号传递的信使，但同时又是氧化应激的来源之一。CheKine? 过氧化氢酶（CAT）活性分析试剂盒（微量法）提供了一种简便、灵敏且特异性强的方法来检测样本中 CAT 的活性。CAT 作为关键的抗氧化酶，能够催化 H?O? 分解为水和氧气，从而保护细胞免受氧化损伤。该试剂盒采用微量法，适用于多种生物样本的检测，如动植物组织、细胞、血清、血浆和尿液等。
二、检测原理
在该试剂盒中，通过特定的显色底物与反应体系中的中间产物相互作用，生成具有特征颜色的产物。该产物在特定波长处具有最大吸收峰，吸光度值与 CAT 活性成正比。通过测定该波长处吸光度的变化，可准确反映 CAT 的活性。
三、实验步骤
（一）样本准备
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细胞样本 ：收集细胞并用适当的裂解液裂解，制备细胞裂解液。
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组织样本 ：取适量组织样本，用生理盐水冲洗以去除表面杂质，然后将其匀浆化并进行裂解处理，制备组织裂解液。
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液体样本 ：血清、血浆样本直接离心取上清；尿液等其他液体样本过滤去除杂质后即可检测。
（二）试剂准备
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试剂配制 ：按说明书配制工作液、显色液和酶溶液，使用前充分混匀。
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试剂预冷 ：将配制好的试剂置于冰上预冷，减少非特异性反应。
（三）反应体系设置
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体系构建 ：在微量反应板中依次加入样本、工作液、显色液和酶溶液，轻轻混匀。
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反应条件 ：37℃孵育 30 分钟左右，使反应充分进行。
（四）检测
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吸光度检测 ：使用酶标仪在特定波长下测定反应体系的吸光值。
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标准曲线绘制 ：用标准品绘制标准曲线，以确定样本中 CAT 的含量。
四、实验结果解读
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含量计算 ：根据吸光值和标准曲线计算 CAT 的含量。
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结果分析 ：CAT 活性可反映细胞的抗氧化能力。例如，在氧化应激状态下，CAT 活性可能增加；在某些疾病状态下，CAT 活性可能异常。
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注意事项 ：严格控制反应条件，避免交叉污染，设置对照组以确保结果的可靠性。
五、应用领域
该试剂盒适用于多个领域，包括代谢研究、疾病研究、食品分析和生物技术等，可用于检测动植物组织、细胞、血清、血浆和尿液等样本中的 CAT 含量，助力科研和实际应用。
